Data di nascita: 1434.
Professione: condottiero, nobile.
Mario Auditore, uno tra i più importanti condottieri operanti nella campagna toscana, era un leader nato. La sua carriera militare prese il via ad appena sei anni, quando giocò un ruolo significativo nel corso della battaglia di Anghiari nel conflitto tra Firenze e Milano: si trovava ad accompagnare il padre in una spedizione a Monterchi, quando avvisò il generale fiorentino Micheletto Attendolo del fatto che si vedevano alcune nubi di polvere sulla strada, segno che le truppe di Milano avevano sferrato un attacco a sorpresa. Grazie a Mario, l'attacco dei milanesi fu sventato e Firenze vinse la battaglia.
Sebbene ad Anghiari Mario si fosse alleato con Firenze, per la maggior parte della carriera difese gli interessi della sua città natale, Monteriggioni, contrastando le mire espansionistiche della stessa Firenze in Toscana.
Quando suo fratello minore Giovanni si trasferì a Firenze nel 1454 per intraprendere la carriera bancaria, Mario rimase nella villa di famiglia a Monteriggioni, scrivendo in una lettera indirizzata al fratello che preferiva "combattere da uomo piuttosto che contare denaro altrui".
Dopo la morte del fratello, Mario accolse Ezio, Claudia e Maria nella villa di famiglia, istruendo Ezio sul conflitto tra gli Assassini e i Templari. Da quel momento, Ezio e suo zio diventarono inseparabili.